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PCR产物纯化试剂盒图片
产品货号:
RFT031
中文名称:
PCR产物纯化试剂盒
英文名称:
PCR product purification kit
产品规格:
100次|200次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统,从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段,同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp~10kb的DNA片段,回收率大于80%(<100bp和>10kb的DNA片段回收率为30~50%)。每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

产品特点:
  • 结合液PB为亮黄色,便于观察体系的pH是否合适。
  • 操作快捷,单个样品操作少于10分钟。



组分100次200次
结合液PB100mL2×100mL
3M NaAc pH5.2500μL500μL
漂洗液PW25mL2×25mL
洗脱缓冲液EB15mL15mL
吸附柱CA2100个2×100个
收集管(2mL)100个2×100个



本试剂盒在室温(15~25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2~8℃。
注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10~20分钟,以平衡溶液温度。


如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
  • 在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液,颠倒混匀后,全部加入到吸附柱CA2中,10000g离心30~60秒,到掉收集管中的废液,将吸附柱CA2重新放入收集管中。
    注:
    • 如果PCR反应体系使用了石蜡油,无需去除,但要使用10倍体积的PB液。
    • 如果反应体系小于50μL,用水补至50μL体系,再加入PB液。
    • 如果体系体积大于700μL,请分次上柱,保证全部溶液均加入到吸附柱中。

  • 向吸附柱CA2中加入700μL漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),10000g离心30~60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
  • 向吸附柱CA2中加入500μL漂洗液PW,10000g离心30~60秒,倒掉废液。
  • 将离心吸附柱CA2放回收集管中,10000g离心2分钟,尽量除去漂洗液。
    注意:此步必不可少!如果漂洗液有残留,将会影响回收效率和DNA质量,进而影响下游实验;离心后将吸附柱盖子打开,室温放置2分钟,这样将有助于彻底挥发残余乙醇。
  • 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。10000g离心2分钟收集DNA溶液。
    注意:
    • 可将洗脱缓冲液EB预热到60~70℃后再加到吸附膜上,这样可以提高洗脱效率。
    • CA2柱的洗脱体积不应少于20μL,体积过小将会降低回收效率。
    • 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0~8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。

  • DNA产物-20℃保存。

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